PGK-gb2-neo
原核及真核新霉素選擇標記盒
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遺傳圖
· PGK-gb2-neo模板可以實現原核及真核細胞中的新霉素/卡那霉素選擇。
· PGK-gb2-neo模板對新霉素/卡那霉素抗性基因進行了編碼,結合了一個用于大腸桿菌中卡那霉素抗性表達的原核啟動子(gb2)和一個用于哺乳動物細胞中新霉素抗性表達的真核啟動子(PGK)。
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原核啟動子gb2是Em7啟動子的微改版。它比通常使用的Tn5啟動子的介導轉錄效率更高。鼠磷酸葡萄糖激酶基因啟動子(PGK)作為真核啟動子使用。一個合成多腺苷酸化信號使卡那霉素/新霉素表達終止。
使用我們提供的PCR模板,您可以輕松創建兩側有限制性位點的PGK-gb2-neo盒,將盒克隆至選擇的載體。限制性位點可以通過在PCR引物中添加相應的序列插入。使用模板,您可以利用單次Red/ET重組輕松產生標的構筑質體。
PGK-gb2-neo模板以質粒為基礎,而非線性(大小為3377bp)。由于其R6K起點,它不能在絕大多數大腸桿菌株中復制。因此,PCR產品可以直接用于下游應用,無需進一步純化。每次反應使用1ul作為模板,至少可以產生20次PCR反應。
目錄
PCR模板(50ng/ul, 20ul)
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序列
PGK-gb2-neo